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依科賽小課堂丨血清使用過程中常見問題解答
伙伴們,依科賽學(xué)院叒開課啦!本次小編為大家?guī)硌迨褂眠^程中常見問題解答,希望對(duì)大家日常實(shí)驗(yàn)有所助力~


Q1:應(yīng)該如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損 ?


建議血清應(yīng)保存在-10℃及以下。若一次無法用完一瓶,無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍時(shí),建議將血清從冷凍室先移至2-8℃冰箱解凍,再放置于室溫進(jìn)行徹底解凍。請注意,解凍過程中需要經(jīng)常搖晃混合。嚴(yán)禁將FBS在37℃長時(shí)時(shí)間孵育解凍。


Q2:培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎 ?


一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在2周內(nèi)使用它。


Q3:如果我的FBS到達(dá)時(shí)已經(jīng)部分解凍,還能使用嗎 ?


所有的ExCell Bio血清都在冰凍狀態(tài)下由干冰運(yùn)輸,因此您收到時(shí)應(yīng)該仍是冰凍狀態(tài)。如果只是部分解凍,F(xiàn)BS仍然可以使用,但是建議先將FBS在冰箱中充分解凍,之后溫和的搖晃搖勻,再移至-10℃及以下進(jìn)行儲(chǔ)存。


Q4:不同批次血清顏色為什么有差異 ?


血清中含有微量的血紅蛋白,與采集血液過程中血細(xì)胞的破裂數(shù)目有關(guān),只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi),顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān),不影響細(xì)胞培養(yǎng)。中國藥典規(guī)定血紅蛋白含量≤200mg/L。


Q5:熱滅活是必須的嗎 ?


實(shí)驗(yàn)顯示,熱滅活對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱滅活的血清,會(huì)增加沉淀產(chǎn)生的概率,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染。熱滅活過程中局部溫度過高,搖晃不均勻,滅活時(shí)間過長,都會(huì)造成血清品質(zhì)下降。若非必須,可以不需要做熱滅活這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!


Q6:血清使用前是否有必要熱滅活,如何熱滅活?


請先確認(rèn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案是否需要對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。一般不建議熱滅活,熱滅活處理會(huì)損失血清中部分營養(yǎng)成分,并且容易發(fā)生蛋白質(zhì)聚集沉淀;少數(shù)對(duì)補(bǔ)體敏感的實(shí)驗(yàn)需要(如某些免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),腺病毒包裝,某些PS培養(yǎng)等),可酌情使用熱滅活血清。熱滅活方法:血清完全解凍充分搖勻后置于56℃水浴中30min,期間不時(shí)晃動(dòng)均勻。


Q7:細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎 ? 如何處理 ?


一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否渾濁,然后在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變渾濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):①細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘??;②配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;③培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除;④血清等級(jí)不足以維持細(xì)胞良好的生長。


Q8:FBS中含有的絮狀物是什么東西 ?


FBS中的絮狀物可能由很多種原因造成,其中最常見的沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋白,不會(huì)影響血清品質(zhì),沉淀若需去除,視沉淀大小500-1000×g,離心5-10min去除,也可不做處理。


Q9:為什么要使用正規(guī)進(jìn)口的血清?


①走私血清缺乏檢驗(yàn)檢疫監(jiān)管,冷鏈運(yùn)輸無法保障,嚴(yán)重影響血清批內(nèi)和批間穩(wěn)定性,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果不可控;②正規(guī)的血清來源于中華人民共和國海關(guān)總署允許進(jìn)口的非疫區(qū)國家,而很多走私的血清往往來自發(fā)生過疫情的國家。未經(jīng)檢疫的血液制品中可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),可能會(huì)對(duì)試者和研究人員的生命健康造成威脅。


Q10:為什么選擇依科賽血清?


依科賽生物作為中國第一家胎牛血清民族品牌,從2006年第一款牛血清上市至今,憑借過硬的產(chǎn)品品質(zhì),以其“正宗血源、正規(guī)進(jìn)口”的合法進(jìn)口安全性,深受客戶的喜愛,助力和見證了生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)的一次又一次的突破和發(fā)展!

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依科賽胎牛血清均采自非疫區(qū)的健康牛,經(jīng)無菌采集、批量混合、3級(jí)100 nm過濾器過濾分裝而成,不含支原體和BVDV、PI3、IBR、BTV等牛源病毒。


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