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Biozol總RNA提取試劑(trizol)
  • 產(chǎn)品貨號:
    BN20537
  • 中文名稱:
    Biozol總RNA提取試劑(trizol)
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價

    備注

  • BN20537-100ml

    100ml

    ¥360.00

產(chǎn)品描述

保存:4℃避光保存,保質(zhì)期 12 個月。 

產(chǎn)品簡介:

     本試劑是一種通用的總 RNA 提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA 抽提,可有效防止 RNA 在提取過程中的降解。獲得的 RNA 可直接用于 Northern 雜交,純化 mRNA,體外翻譯,RNase 保護實驗,RT-PCR 以及cDNA 克隆等一系列操作。該試劑可用于 100 次總 RNA 提?。?0 平方厘米細胞或 100mg 組織)。

操作說明:自備新開封或?qū)S寐确?、異丙醇?5%乙醇、DEPC處理水

1、細胞裂解或組織勻漿:

1)貼壁細胞:吸盡培養(yǎng)液,每 10 平方厘米(6 孔板孔或 35 mm 平皿)細胞加入 1 ml Biozol,使其覆蓋培養(yǎng)細胞, 再用吸管或加樣器吹打 2~3 次,細胞應(yīng)完全裂解,然后轉(zhuǎn)移至離心管中。 

2)懸浮細胞:離心收集細胞,吸盡液體,每五百萬至一千萬(5×106-1×107)動植物或酵母細胞,或一千萬 (1×107) 細菌,加入 1ml Biozol 。用吸管或加樣器吹打,使其完全裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分,可用勻漿器勻漿,以確保其完全裂解。轉(zhuǎn)移至離心管中。

3)組織:先將組織剪切成小塊,放入玻璃勻漿器內(nèi)。冷凍組織可在研缽中研磨勻漿。每 50-100mg 組織加入 1ml Biozol ,勻漿至完全裂解。轉(zhuǎn)移至離心管中。

   裂解產(chǎn)物應(yīng)呈澄清的透明粘稠液體。室溫放置 5 分鐘。對于多糖、蛋白等雜質(zhì)豐富的組織樣品,勻漿后仍會存留有不溶物質(zhì),可 12000g 4℃離心 10 分鐘,然后吸取上清至一新的離心管中。

2. 分離:在裝有裂解物的離心管中加入 0.2 倍體積的氯仿(1 ml Biozol 加入 0.2 ml 氯仿),振蕩器上充分振蕩 混勻 30 秒,室溫放置 2-3 分鐘。12000g 4℃離心 10 分鐘,然后吸取含總 RNA 的上層水相至一新的離心管中,每 毫升 Biozol 約可吸取 0.5-0.6 ml。有機相和中間層含有 DNA 和蛋白質(zhì),應(yīng)避免觸及。 

3. 沉淀:按每毫升 Biozol 加入 0.5 ml 異丙醇,顛倒數(shù)次混勻,室溫沉淀 10 分鐘。12000g 4℃離心 10分鐘,在 管底可見 RNA 沉淀。棄上清,按每毫升Biozol 加入 1 ml 75%乙醇,輕輕顛倒混勻,以清洗RNA 沉淀。12000g  4℃離心 2 分鐘,棄去液體,小心勿丟棄 RNA 沉淀。室溫倒置晾干 5~10 分鐘。 

4. 溶解:加入適量 DEPC 處理水使 RNA 沉淀溶解。存放于-80℃。

注意事項:

1,RNA 提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應(yīng)保證無污染無 RNA 酶。操作中應(yīng)小心,防止外源性 RNA 酶污染樣品導(dǎo)致 RNA 樣品降解。 

2,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個人防護。