貨號
產(chǎn)品規(guī)格
售價
備注
BN12032-50 μL
50 μL
¥1388.00
產(chǎn)品描述
應用范圍:實時定量 PCR、高分辨率溶解曲線
產(chǎn)品參數(shù)
λabs/λem = 500/530 nm (結合 DNA)
λabs = 471 nm (未結合 DNA)
儲存條件:4℃ 或-20℃,避光保存,有效期 1 年。
產(chǎn)品介紹
Super EvaGreen?是一種用于實時定量 PCR(qPCR) 的 DNA 結合染料。該染料的諸多優(yōu)點使它遠勝于 SYBR Green I。除了有相似的光譜特性,Super EvaGreen 有三個主要特點使它區(qū)別于 SYBR Green I。
首先,Super EvaGreen?對 PCR 的抑制性遠小于 SYBR Green I。因此,使用 Super EvaGreen?進行的 qPCR 實驗可以使用快速 PCR 步驟。同時,Super EvaGreen?在實驗中可以使用較高的濃度,從而獲得遠強于 SYBR Green I 擴增信號。較高濃度的 Super EvaGreen?也消除了“染料重 分布”的缺陷,使 Super EvaGreen?既可用于多重 PCR,也可用于高分辨率(高清晰)溶解曲線分析(HRM)。該分析正被越來越多的用于 PCR 后的基因分型和異源雙鏈分析。 由于 SYBR Green I 對 PCR 的抑制性,從而要求其使用濃度必須很低,因此 SYBR Green I 無法解決由低濃度造成的 染料重分布問題,既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM。 同時,染料重分布問題也可能影響常規(guī)熔解曲線的可靠性, 因為低熔點的 DNA 鏈可能由于這種原因而無法檢測到。
第二,Super EvaGreen?的穩(wěn)定性極強。在正常的儲存、操作和 PCR 過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里,也可以反復凍融。與之相反,SYBR Green I 不穩(wěn)定而且降解后對 PCR 抑制性更強。
第三,Super EvaGreen?降低了細胞膜透性,因而比 SYBR Green I 更加安全。獨立實驗室的測試結果顯示,Super EvaGreen?既沒有誘變性也沒有細胞毒性。相反,雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱,但它在細胞中可能抑制了正常 DNA 的修復機制,使其有誘變增強作用??紤]到 PCR 的廣泛使用,其安全性應該足夠重視。
使用方法
1. 如下建立實驗體系:(僅供參考)
2000 × Super EvaGreen?儲液先用去離子水稀釋 100 倍,制備成 20 × Super EvaGreen?的工作液。
實驗目的:實時定量 PCR 檢測 2000 × Super EvaGreen?